近年來中藥制劑的發(fā)展比較迅速，但在純中藥制劑中添加化學(xué)藥，嚴(yán)重違反了國家法規(guī)，威脅患者的健康。格列本脲又叫優(yōu)降糖，是一種降糖效果明顯的西藥，但是由于副作用也比較明顯，因此許多患者不適合服用這種口服降糖藥。尤其是在不知情的情況下服用格列本脲 更是非常危險的。長期大量地服用格列本脲，zui終會造成病人的低血糖，甚至導(dǎo)致死亡。另外，誘導(dǎo)患者服藥時不需要控制飲食，也會導(dǎo)致病人死亡。因此必須建立快速、靈敏、可靠的分析檢測方法，為純中藥制劑驗(yàn)明正身。
1、液相色譜儀檢測某些中藥制劑中的格列本脲儀器與試藥
液相色譜儀；日本島津公司HPLC系統(tǒng)(包括LC一10AD泵，Rheodyne7125進(jìn)樣閥)。
格列本脲對照品(純度為99.5％)；6種純中藥降糖藥物(分別為不同廠家6個批 次：20030108，200203O2，20020601，010401，20020621和20010313)；甲醇，乙腈(色譜純)，甲酸(分析純)，水為二次重蒸水。
2、液相色譜儀檢測某些中藥制劑中的格列本脲實(shí)驗(yàn)方法
2.1 色譜條件色譜柱：ZorbaxEclipseXDB-C8柱(5μm粒徑，150×4.6mm，Agilent)；活動相：乙腈-水-甲酸(70：30：1)；流速：O.5mL/min；柱溫：室溫；進(jìn)樣量5OμL。
2.2 質(zhì)譜條件電噴霧離子源，正離子檢測，離子源噴射電壓：4.50kV；毛細(xì)管溫度：200℃；毛細(xì)管電壓：6.25V；鞘氣流速：1.05L/min；輔助 氣流速：O.15L/min；檢測方式：一級全掃描方式、二級全掃描方式、三級全掃描方式和選擇離子監(jiān)測方式(SIM)。
2.3 格列本脲標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制精密稱取一定量的對照品置容量瓶中加人活動相溶解并稀釋至刻度，使?jié)舛葹?00μg/mL。
2.4 受試溶液的配制取不同批號的被試膠囊各10粒，取出內(nèi)容物分別混勻，將相當(dāng)于1粒膠囊內(nèi)容物重量的樣品分別置10mL具塞玻璃試管中，加進(jìn)3mL甲醇，渦流2min，超聲20min，離心10min，取上清液用于分析測定。
3、液相色譜儀檢測某些中藥制劑中的格列本脲實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 格列本脲的色譜和質(zhì)譜行為采用正離子檢測方式對格列本脲對照品進(jìn)行LC／MS分析，其保存時間為6.4min；多級質(zhì)譜分析結(jié)果，在一級全掃描質(zhì)譜分析中 產(chǎn)生的準(zhǔn)分子離子[M H] 峰為m／z494，[M Na] 峰為m／z516，[2M H] 峰為m／z987，[2M Ma] 峰為m／zlO09，在二級全掃描質(zhì)譜分析中，分子中胍基左側(cè)的酰胺鍵斷裂產(chǎn)生m／z369的碎片離子，進(jìn)一步對m／z369進(jìn)行三級全掃描質(zhì)譜分析，主 要產(chǎn)生左側(cè)酰胺鍵斷裂天生的碎片離子m／z169，總結(jié)其裂解途徑，為實(shí)際樣品中化合物的鑒定提供了可靠的依據(jù)。
3.2 待測樣品的檢測結(jié)果在相同的色譜及質(zhì)譜條件下對6種純中藥制劑的甲醇提取液進(jìn)行LC／MS分析，均檢測到色譜行為與格列本脲對照品相同的化合物，而且在相 應(yīng)的一級全掃描質(zhì)譜分析中檢測到與格列本脲相同的準(zhǔn)分子離子m／z494；為進(jìn)一步確定所檢測到化合物的結(jié)構(gòu)，對其進(jìn)行多級質(zhì)譜分析，該化合物的二級及三 級全掃描質(zhì)譜與格列本脲對照品*相同，由此可以證實(shí)在6種被試中藥降糖藥物中所檢測到的化合物為化學(xué)藥格列本脲。
4、液相色譜儀檢測某些中藥制劑中的格列本脲討論
本文采 用LC／MS技術(shù)，將液相色譜的高分離能力與質(zhì)譜分析的高選擇性相結(jié)合，對純中藥制劑中非法摻進(jìn)的化學(xué)降糖藥格列本脲進(jìn)行多級質(zhì)譜分析，對其進(jìn)行了結(jié) 構(gòu)確證，增強(qiáng)了檢測結(jié)果的可信度。該法靈敏度高，選擇性強(qiáng)，對該中藥制劑的質(zhì)量控制具有現(xiàn)實(shí)意義。
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